کیت های تعیین ‏HLA‏ شرکت ‏TBG‏ آمریکا (‏texas biogene‏)‏

جهت مشاهده تصویر بزرگتر بر روی تصویر زیر کلیک کنید
98
تعداد بازدید: 2058

HLA A-EX B-EX DRB-EX کیت های تعیین ‏HLA‏ شرکت ‏TBG‏ آمریکا (‏texas biogene‏)‏ بر مبنای روش ‏DNA‏ (‏DNA-based method‏)‏ با استفاده از تکنیک ‏SSP‏ ‏‎–‎‏ ‏PCR‏ (‏POLYMERASE CHAIN REACTION-SEQUENCE ‎SPECIFIC PRIMER(‎ صحت، کارایی و کیفیت بالا قابلیت انجام تست با حداقل مقدار ‏DNA‏ (10 ‏‎–‎‏ 40 ‏ng/µl‏ برای هر تست)‏ قابلیت انجام تست با حداقل مقدار ‏Taq‏ و حداقل زمان در حدود 1 ساعت 25 دقیقه استفاده از چاهک های دوتایی برای بالا بردن سرعت انجام تست به میزان دو برابر نرم افزاری با مدیریت آسان تحت ‏Windows پرایمرهای با قدرت پوششی بالا (‏A‏d، ‏B‏P، ‏DBR‏

توضیحات فنی

    - قابلیت انجام تست با حداقل مقدار ‏DNA‏ (10 ‏‎–‎‏ 40 ‏ng/µl‏ برای هر تست)‏
    - قابلیت انجام تست با حداقل مقدار ‏Taq‏ و حداقل زمان در حدود 1 ساعت 25 دقیقه
    - استفاده از چاهک های دوتایی برای بالا بردن سرعت انجام تست به میزان دو برابر
    - نرم افزاری با

اطلاعات شرکت

امرافر emrafar
شرکت - عادی (در انتظار عضویت)
موقعیت روی نقشه
ایران
تهران
 
  • نوع فعالیت: وارد کننده
  • مدیرعامل: خسرو امینی رئوف پور
  • محصولات/خدمات:
  • Automatic Elisa 4 plate , caliper lap Chip , Respiratory infection , DNA Mag Pure 12 , HLA , Auto Lipa Automation , لوازم و دستگاه ها , کیت های تعیین ‏HLA‏ شرکت ‏TBG‏ آمریکا (‏texas biogene‏)‏ , تشخیص ژنوتایپ ‏HPV‏ با روش مولکولی (ریورس بلات)‏‎ EXTRA , DNA Mag Purix 24 , Biorad CFX‏96‏ , Kit Ofuni , See Prep ‎‏12‏ , Kit DNA , Kit HCV Innogenetics , Meningitis , Sepsis , Automatic Elisa agility12 , دستگاه های اتوماسیون الایزا DYNEX ‎ , BIOTECHNOLOGT FOR HEALTHCARE
  • تگ های مرتبط: B27, همانندسازی, پیوند اعضا, HLA, MHC, HLA TYPING, اچ ال ا, روش انجام ازمایش hla, انواع hla, ازمایش خون hla

برخی از محصولات این شرکت

توضیحات
بررسی مولکول های MHC و آزمایش HLA_Typing مولکول های MHC را در انسان HLA می نامند. مولکول HLA دارای دو کلاس اصلی است: 1) HLA I: شامل زیر کلاس های A,B,C که روی همه ی سلول های هسته دار بدن وجود دارد. 2) HLA II: شامل زیر کلاس های DR,DQ,DP که روی سلول های عرضه کننده ی انتی ژن (APC) قرار گرفته اند. * کلاس I روی همه ی سلولهای بدن انسان وجود دارد پس میزان بیان آن نسبت به کلاس II که فقط روی APC ها وجود دارد بیشتر است. *هر فرد هر6 نوع HLA را به صورت نهفته در ژنوم دارد و در صورت هتروزیگوت بودن مسلما 2 دست از این ها را خواهد داشت. می دانیم افراد در مورد بیان ژن ها کاملا unic( منحصر به فرد) هستند؛ به این صورت، توالی ای که فرد از کنار هم قرار دادن HLAها دارد کاملا منحصر به فرد بوده و آلوتایپی که شخص بیان می کند کاملا یونیک است و دو فرد مشابه از این نظر مشاهده نمی شود، مگر در دوقلو های همسان که تا حدود 98% مشابه هم هستند اما سیستم ایمنی در این افراد نیز تفاوت هایی را قائل می شود. کاربرد های HLA: 1)پیوند اعضا: مهمترین کاربرد این مولکول ها در علم پزشکی پیوند اعضا است. این موضوع منحصرا منجر به شناخت این مولکول ها شد و در حال حاضر نیز مهمترین کاربرد آن در همین مبحث است. جایی که برای یک گیرنده ی عضو به دنبال یک دهنده مناسب می گردیم باید تا حد امکان بین دهنده و گیرنده قرابت وجود داشته باشد و برای تایید این موضوع باید HLA Typing انجام شود که مهمترین آنها در مورد HLA A,B,DR انجام می شود. یعنی حداقل در این 3 مورد باید حداکثر شباهت و قرابت وجود داشته باشد. هر چقدر HLA های دهنده و گیرنده دارای شباهت بیشتر باشد طول عمر پیوند بیشتر است؛ به طور کلی هر پیوندی در هر بافتی از بدن توسط سیستم ایمنی دفع می شود حال با توجه به میزان شباهت HLAهای موجود در سطح سلول های عضو پیوندی با سایر اعضا، در زمان ماندگاری و حفظ پیوند تفاوت هایی به وجود می آید.بالاترین میزان ماندگاری پیوند مربوط به دو قلوهای همسان است اما امروزه با تکنیک های همانندسازی (Coloning) میتوان بافت هایی با MHC خود شخص گیرنده کولونیزه کرد که 100% این پیوند مورد پذیرش بدن است. 2) ارتباط با بیماری:مشخص شده که یک سری از بیماری ها با بعضی از مولکول های HLA ارتباط نزدیکی دارند یعنی ژن های این بیماری ها و ژن های بیان کننده ی HLA ها با هم حرکت می کنند. به عنوان مثال دیده شده که در مورد افرادی که به بیماری اسپاندلیت آنکیلوزان* مبتلا هستند( حدود 80% مبتلایان) در بدن خود MHC B27 را بیان می کنند. یا در مورد افراد مبتلا به سندرم بهجت** MHC B5 بیان می شود. افراد مبتلا به خود ایمنی MHC B8 و افراد جمعیت دیابتیک MHC DR4 را بیان می کنند. *اسپاندلیت آنکیلوزان: در این بیماران ستون مهره های بدن دچار التهاب شده و ضایعات هسته دار ایجاد می شود این افراد به تدریج در نواحی انتهایی ستون فقرات چسبندگی هایی ایجاد می شود که در نهایت موجب بد ریختی های ستون فقرات میگردد. این بیماری معمولا با خشکی بدن در صبح آغاز می شود و به تدریج پیشرفت می کند. **سندرم بهجت: مبتلایان به این بیماری افرادی هستند که عوارض چشمی و مخاطی خیلی زیادی دارند و تعدد آفت های دهانی به صورت طولانی،مکرر و شدید در این افراد دیده می شود. نکته مهم: HLA ها عوامل ایجاد کننده ی بیماری نیستند؛ در تئوری های مختلف مطرح شده بررسی این موضوع که چرا در بیماری های مختلف یک سری از HLA ها بیشتر بیان می شوند، مورد ارزیابی قرار گرفته که در نتیجه آنچه مورد تایید است آن است که ژن های این بیماری ها و MHCهای مربوط به آنها با هم حرکت می کنند و با ایجاد آن بیماری، آن MHC نیز افزایش می یابد.(احتمالا به دلیل نزدیکی برخی ژن ها) پس در فرایند تشخیص بیماری پزشک با مقایسه ی وضعیت بالینی بیمار با پاسخ آزمایش HLA Typing مورد درخواست، به تشخیص خود مهر تایید میزند. –> در حقیقت این آزمایش کمکی برای تشخیص و تایید بیماری فردی است که دارای یک سری علائم بالینی است اما متاسفانه در کشور ما هنوز این آزمایشات در ابعاد تشخیص و پیشگیری مرسوم نشده است. 3) مطالعات جمعیت شناختی: در حقیقت شناخت این که یک جمعیت دارای چند نوع HLA مشترک هستند بسیار مهم است. البته این نوع شناخت، هم در جهت کمک به بشر و هم در جهت تخریب بشر می تواند استفاده شود. در مطالعات جمعیت شناختی با اندازه گیری گسترش یک HLA در بین یک جمعیت خاص با ایجاد یک بانک حفاظت شده جهت محافظت از ژن این افراد تحت نظارت سازمان جهانی بهداشت، می توان به سادگی مشخص کرد که چه نوع بیماری شایع بین این افراد است، چه اقدامات پیش گیرانه ای می توان انجام داد، شجره ی یک فرد به کدام قوم یا مذهب برمیگردد و ازاین دست مطالعات بر جمعیت ها انجام دهند. * ایران از نظر مطالعات جمعیت شناختی یک کشور ناهمگون از نظر ژنتیکی است و تا حدودی می توان گفت HLA مشترکی بین همه ی آنها وجود ندارد، مگر در بین اقوام و اقلیت های دینی کوچک مثل زرتشتیان(به علت اینکه این افراد ازدواج های درون مذهبی دارند و طی چندین نسل از نظر ژنتیکی شباهت زیادی به یکدیگر دارند).البته این موضوع مثبت است چرا که تنوع ژنتیکی در بین جمعیت شانس بقا و تکامل را افزایش می دهد. جمعیت های ژنتیکی کوچک همیشه تحت تاثیر یک بیماری چه به صورت طبیعی و چه به صورت حملات بیولوژیک، از بین می روند و در خطرند. روش تشخیص مولکول HLA: 1) استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال: که برای تشخیصMHCهای تیپ I و DR مورد استفاده می شود. 2) روش های جدید با رزولوشن بسیار بالا: پایه ی اصلی آن PCR است اما با یک سری تغییرات میزان دقت و عملکرد آن را بالا برده اند. مثل: SCOP PCR و SCSP PCR و SNP PCR. که دقیق ترین آن ها SNP PCR است. این روش ها برای تشخیص MHC II استفاده می شوند. روش کار با آنتی بادی های مونوکلونال: روش کلی به این صورت است که یک سلول هسته دار بدن (به طور معمول یک بافت خونی) انتخاب می شود. بهترین سلول مورد استفاده مونونکلئارسل ها هستند. روی این سلول ها آنتی ژن وجود دارد.( AG=HLA I –> به مقدار خیلی زیاد روی همه ی سلول های بدن وجود دارند.) آنتی بادی اختصاصی علیه MHC مورد بررسی را روی نمونه می ریزیم تا کمپلکس MHC_Ab تشکیل شود. سپس با اضافه کردن کمپلمان خرگوش، در صورت اتصال MHC به Ab کمپلمان فعال می شود و سلول را لیز میکند. مرگ سلولی در این آزمایش نشان از وجود MHC ای است که آنتی بادی علیه آن استفاده شده بود.در حقیقت زمانی که MHC_AB تشکیل میشود آنتی بادی استفاده شده در ناحیه ی Fc خود تغییراتی ایجاد میکند که جایگاه اتصال کمپلمان و در نتیجه فعال سازی آن را موجب می شود. پس در صورت عدم اتصال،آن Ab تغییری نمیکند و کمپلمان به جایگاه مربوطه متصل نشده و فرایند لیز سلولی اتفاق نمی افتد. به این روش که اساس آن مجاورت آنتی بادی با MHC است Microcytotoxicity می گویند. *توسعه صنعت آنتی بادی های مونوکلونال باعث شده که امروزه یک پنل بسیار کامل از انواع آنتی بادی های مونوکلونال که به صورت اختصاصی MHC خاصی را می شناسد، وجود داشته باشد. روش کار: 1) از نمونه خون دفیبرینه ی بیمار مونونکلئارسل را جدا میکنیم.( با استفاده از محلول فایکول–> برای اطلاعات بیشتر به مبحث تست روزت(روش کار)مراجعه کنید.) 2) از سوسپانسیون سلولی تهیه شده 1میکرولیتر در هر حفره ی پلیت* می ریزیم.(توجه داشته باشید به دلیل انکوباسیون های طولانی و میزان کم نمونه و شناساگر ها، در حفرات پلیت گلیسرول می ریزند که علاوه بر جلوگیری از تبخیر نمونه در حین انکوباسیون، مواد اضافه شده را به سمت وسط و ته پلیت هدایت می کند که این موضوع باعث برخورد بهتر مواد با یکدیگر می شود؛ باید توجه داشت که نمونه و مواد دیگر را زیر گلیسرول Pipeting کنیم چرا که اگر روی گلیسرول بریزیم به ته حفره نمی رود و همان جا شناور می ماند.) *پلیت مخصوص این آزمایش ترازاکی نام دارد. این پلیت حاوه 60 حفره است که در ته آن آنتی بادی های مورد نظر قرار دارد. این پلیت ها معمولا به صورت آماده (آنتی بادی به ته حفره چسبیده است) خریداری می شود. 3) 60 دقیقه انکوباسیون زمان مناسبی است تا آنتی ژن های محتمل موجود در سطح سلول با آنتی بادی ته حفرات واکنش دهند. 4) پس از زمان فوق الذکر 1 میکرولیتر کمپلمان خرگوش به مجموعه اضافه میکنیم. 5) به مدت 30 الی 45 دقیقه انکوبه میکنیم تا در صورت تشکیل کمپلکس های MHC_Ab ، کمپلمان سلول ها را لیز کند. 6) پس از پایان انکوباسیون 2 میکرولیتر رنگ ائوزین به مجموعه ی فوق اضافه می کنیم 7) پلیت را با میکروسکوپ Invert بررسی می کنیم؛ که پاسخ آزمایش به دو صورت محتمل است: I)در صورتی که سلول ها رنگ را گرفته باشند و غشای آنها مضرّس شده باشد نشان از مرگ سلول و در نتیجه وجود HLA مورد نظر بر روی سلول های فرد است. II) اگر سلول ها همچنان کامل،بدون شکست غشایی و بدون رنگ باشد نشان از زنده بودن سلول است که در نتیجه HLA مورد نظر بر روی سلول های فرد وجود ندارد. *در حفره ها ممکن است سلول های مرده و زنده باهم وجود داشته باشند که در یک پروتکل کلی اگر 30% از سلول ها مرده باشند نشان از وجود HLA مورد نظر بر روی سلول های فرد و مثبت بودن پاسخ آزمایش است.


نظرات بیندگان
نظر شما
نام و نام خانوادگی :
ایمیل :
سوال یا نظر شما : ( لطفا اطلاعات تماس خود را وارد کنید) :

خانه چاپ ارسال به دوستان نسخه متنی کوچک کردن متن بزرگ کردن متن دانلود خروجی پی دی اف خروجی میکروسافت ورد
تعداد بازدید : 2058
5.5/10 (تعداد آرا 10 نفر )