خانه > بایگانی/آرشیو برچسب ها : PCR

بایگانی/آرشیو برچسب ها : PCR

مشکلات گزارش شده در روش PCR

مشکلات گزارش شده یکی از مشکلات اساسی گزارش شده در روش PCR، آلودگی تیوب‌ها با محتویات یکدیگر است. این مسئله را می‌توان با استفاده از تکنیک‌های صحیح آزمایشگاهی بر طرف نمود و ربطی به دستگاه چرخاننده دما ندارد. ذرات معلق در هوا (آئروسل)، در هنگام باز کردن درب تیوب‌ها ایجاد …

بیشتر بخوانید »

اصول عملکرد دستگاه‌های چرخانند دما معمولاً یک واکنش PCR نیاز به DNA الگو، دو عدد پرایمر، چهار نوع دی اکسی نوکلئوتیدتری فسفات (dNTP)، غلظت مشخصی از بافر منیزیم کلراید(MgCl2) و نوعی از آنزیم DNA پلیمراز مقاوم به حرارت (مشخصاً Taq پلیمراز) دارد. اقلام فوق را در یک ویال کوچک ریخته …

بیشتر بخوانید »

دستگاه‌های چرخاننده دما

کاربرد اولیه چرخاننده دما (Thermal Cycler) انجام واکنش‌های زنجیرهای پلیمراز (PCR) می‌باشد. PCR روش تکثیر یک توالی خاص از مولکول DNA می‌باشدکاربرد اولیه چرخاننده دما (Thermal Cycler) انجام واکنش‌های زنجیرهای پلیمراز (PCR) می‌باشد.

بیشتر بخوانید »

بعضی از انواع PCR

برای به دست آوردن توالی‌های نادر از این نوع PCR استفاده می‌شود. این روش احتمال به دست آوردن محصول اختصاصی را نیز افزایش می‌دهد

بیشتر بخوانید »

کاربردهای PCR

کاربردهای PCR اولین بار از PCR برای تکثیر قطعه‌ای از DNA رمزگردان بتا گلوبین انسان برای تشخیص کم خونی داسی شکل در جنین استفاده شد. هم اکنون کاربردهای مختلفی از PCR در تحقیقات علوم پایه و تشخیص بیماری‌ها وجود دارد. امروزه از PCR تنها برای تکثیر یک قطعه DNA هدف …

بیشتر بخوانید »

واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) بخش دوم

پرايمرها انتخاب پرایمرها، مهم‌ترین عامل موفقیت در انجام واکنش PCR است. امروزه برنامه‌های کامپیوتری برای طراحی پرایمرها وجود دارد. برای انتخاب پرایمر (آغازگر)، باید به چند مورد توجه داشت: ۱- انتشار بازها تصادفی باشد، تا از ایجاد توالی‌های پلی پورین یا پلی پیریمیدین یا توالی‌های تکراری جلوگیری شود. ۲- توالی‌های …

بیشتر بخوانید »

اجزای واکنش PCR بخش اول

اجزای واکنش PCR بافر PCR و  MgCl2 بافر PCR، شرایط یونی و pH مناسب برای واکنش PCR را فراهم می‌کند. معمولاً غلظت این بافر 1010 برابر غلظت نهایی در مخلوط واکنش، تهیه شده و در مواقع استفاده رقیق می‌شود. این بافر حاوی تریس  tris)) ۱۰۰   میلی مولار با 3/8 = …

بیشتر بخوانید »