روش آویدن – بیوتن   (Avidin – biotin technique)

روش آویدن بیوتن   (Avidin – biotin technique)

بیوتین یک ویتامین با وزن مولکولی پائین را می­توان با پیوندهای کووالانت به آنتی­بادی اولیه متصل کرد و یک

کنژوگه بیوتین آنتی­بادی ایجاد کرد که وقتی به برش بافتی اضافه می­شود در محل آنتی­ژن مورد نظر متصل گردد.

آویدین گلیکوپروتئین سفیده­ی تخم ­مرغ ۴ محل اتصال برای بیوتین دارد. بنابراین آویدین را می­توان به عنوان پلی برای

رنگ­آمیزی ایمونو آنزیمی چند لایه کاربرد دارد.

افزودن آویدینی که به صورت شیمیایی با horseradish Peroxidase کنژوگه شده است منجر به اتصال قوی آویدین

و بیوتین می­گردد (شکل ۴) و محل آنتی­ژن را مشخص می­کند. این روش سریع بوده ولی به­اندازه­ی روش حساس نیست.

سیستم آویدین – بیوتین توسط Hsu و همکاران در سال ۱۹۸۱ تحول یافت و به صورت Avidin – biotin – peroxidase complex یا به اختصار ABC درآمد.

در این روش از کمپلکس آویدین با ملکول پراکسیدازی که خود متصل به بیوتین است استفاده شده و به صورت

یک روش غیرمستقیم از آن استفاده می­شود.

در این روش آنتی­بادی اولیه به یک آنتی­بادی ثانویه که با بیوتین کنژوگه ضده متصل می­گردد.

سپس آنتی­بادی ثانویه جاوی بیوتین به کمپلکس آویدین پراکسیداز و بیوتین متصل می­شود.

چون کمپلکس به صورت شکبه است باعث می­شود که چندین ملکول پراکسیداز به یک آنتی­ژن متصل شده

و در نهایت حساسیت روش را نسبت به روش PAP افزایش دهد.

 

0/5 ( 0 بازدید )

محصولات مرتبط

بازدید: 1

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *


دانلود اپلیکیشن اندروید پارامد پارامد-اپلیکیشن رد کردن