Bcell

Bcell  * ( روش تشکیل روزت)(Rossete Formation Method (BCell Detection

نام آنالیت:Bcell

شمارش درصد سلول های B در بیماری های نقص ایمنی از ارزش ویژه ای برخوردار است.

روش کلاسیک جهت شمارش درصد لنفوسیت­هایB دارای رپستور برای C3 کمپلمان

می­باشند.

در این روش ابتدا SRBC را با کمپلمان و AntiSRBC Hemolysin می­پوشانند و پس از طی مراحلی تعداد آنها را بهm ×80 می رسانند

(به این مخلوط EAC  یا Erthrocyte Antibody Complement  می گویند) این مخلوط

را در مجاورت لنفوسیت­ها( که مشابه روش Tcell  جدا شده اند) قرار داده, انکوبه می­کنند. پس از پایان مراحل انکوباسیون رسوب حاصل در ته لوله­ها را بین لام و لامل قرار داده

و از لحاظ درصد لنفوسیت­های متصل به EAC بررسی می­کنند. محدوده طبیعی Bcell  با این روش 20-15% می­باشد.

روش­های نوین شمارش Bcell  روش بررسی فلئورسانس در زیر میکروسکوپ فلئورسانس

در زیر میکروسکوپ فلئورسانس و فلوسایتومتری است که شرح آن در روش Tcell  آمد.

* MIF (فاکتور مهار کننده مهاجرت)

Macrophage Migration Inhibitory Factor))

نام آنالیت: لنفوکاین,فاکتور مهارکننده مهاجرت

ساختمان و متابولیسم: لنفو کاین (فاکتور مهار کننده مهاجرت) بعد از تحریک برخی از لنفوسیت­ها که توسط آنتی ژن اختصاصی حساس شده اند تولید می­گردد.

این فاکتور با سطح سلول ماکروفاژ واکنش می دهد و سبب بروز تغیراتی در غشاء

ماکروفاژ شده که با تجمع ماکروفاژها همراه است و از مهاجرت ماکروفاژ ها به خارج

از محل التهاب جلوگیری می­کند.

(وزن مولکولی MIF  کمتر از وزن مولکولی ایمونوگلوبولین­ها می­باشد و از جنس پروتئین است توسط آنزیم­های پروتئولیتیک تخریب می­گردد).

معرفی آزمایش, کاربرد بالینی: این آزمایش در ارزیابی ایمنی سلولی استفاده می­شود.

در مواردی نظیر واکنش­های آلرژی، بیماری هوچکین, نقص ایمنی، لنفوما، نفریت، سارکوئیدوز، مصرف داروهای شیمی درمانی این فاکتور افزایش می­یابد.

اساس روش متداول: پس از جدا کردن گلبول های سفید را شستشو داده و پس از

طی مراحل متعدد درصد مهاجرت آن­هارا می­سنجند.

نوع نمونه قابل اندازه گیری: خون تازه (سریعا به آزمایشگاه فرستاده شود و آزمایش در همان روز جمع آوری انجام شود)

که حتما به عنوان ضد انعقاد باید به آن هپارین اضافه شود.

محدوده طبیعی:

Requires interpretation

50-2 بخش V– سرولوژی و ایمونولوژی

واکنش تداخلی: نتایج در نمونه­هایی که تازه نیستند و در همان روز جمع آوری انجام

نمی­شوند غیر قابل قبول می­باشد.

معایب و فواید روش حاضر: –

  • MLC ( کشت مخلوط لنفوسیتی) ( Mixed Lymphcyte Culture)

شناسایی آنتی ژن­های پیوندی به وسیله آزمایش کشت مخلوط لنفوسیتی,Mixed Lymphcyte culture

آزمایش MLC در تشخیص سازگاری آنتی ژن های کلاس II  اهدا کننده و گیرنده بکار می­رود. نتایج این آزمایش در انتخاب کلیه و مغز استخوان مناسب برای پیوند به گیرنده کاربرد دارد . در روش MLC یک طرفه, لنفوسیتها  B فرد اهدا کننده با مهار کننده­ی سنتز DNA

مثل اشعه X یا سیتومایسین C برای توقف سنتز  DNA مهار می­شود.

لنفوسیت­های B فرد اهدا کننده به عنوان تحریک کننده و لنفوسیت­های شخص گیرنده

به عنوان پاسخ دهنده با یکدیگر مجاور می­شوند. اگر این دو جمعیت سلولی از نظر HLA یکسان باشند و هیچگونه اختلاف کلی در سازگاری آنتی ژن جمعیت سلولی گیرنده و دهنده وجود نداشته باشد،  هیچ تحریکی ایجاد نمی­شود.

ولی زمانی که یک یا چند ناسازگاری میان جمعیت­های سلولی اهدا کننده و گیرنده

وجود داشته باشد سبب تحریک و تکثیر سلولی می­شود که با برداشت مواد پیش نیاز

تولید DNA محیط که با رادیو اکتیو نشان دار شده­اند توسط سلول­های گیرنده برای تولید DNA جدید همراه می­باشد. واکنش قوی با شمارش رادیو اکتیویته بالا، نشان دهنده ­یاختلاف در آنتی ژن­های HLA_D دهنده و گیرنده می­باشد.

آنتی ژن­های   HLA_DR مهمترین شاخص در واکنش MLC می باشند، اگر چه HLA_DP و HLA_DQ نیز در آن مشارکت دارند.

لازم است تاکیید کنیم که مهم ترین عمل در رد پیوند، ناسازگاری و عدم هماهنگی

آنتی ژن­های کلاس II است .

با وجود اینکه آزمایش MLC روشی کاملا مناسب برای بررسی تطابق بین دهنده و

گیرنده می باشد، اما چندین روز طول می­کشد، در حالی که آزمایش سرولوژیک تنها به

چند ساعت وقت نیاز دارد.

  • PLC ( کشت لنفوسیت های حساس شده)

آزمایش کشت لنفوسیت­های حساس شده:Primed Lymphocyte Culturc

آزمایش لنفوسیت­های حساس شده نوع دیگری از آزمایش­های سازگاری سلولی است.

در این روش لنفوسیت­هایی ک در آزمایش MLC تکثیر شده­اند در شرایط کنترل شده

برای 14-9 روز، دیگر کشت داده شده و سپس به عنوان سلول­های حساس شده­ی

پاسخ دهنده، مورد استفاده قرار می­گیرند.

تحریک مجدد با سلول­های تحریک کننده که دارای آنتی ژن های  DP,DQ, DRکاربرد

داشته باشند .

نتایج این آزمایش با نتایج MLC مطابقت دارد. آزمایش لنفوسیت­های حساس شده آنتی ژن های DP را با کارایی بیشتری نسبت به روش کشت مخلوط لنفوسیتی نشان می­دهد .

این روش پیچیده تر و گران تر از MLC است .

همچنین ببینید

آنتی بادی ضد ویروس روبلا (IgG)

آنتی بادی ضد ویروس روبلا (IgG) Anti Rubella Virus – Antibody (IgG) نام آنالیت: آنتی …

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *