هضم پروتئولیتیک آنزیمی (Protolytic enzyme digestion)

هضم پروتئولیتیک آنزیمی     (Protolytic enzyme digestion) استفاده از فرمالین به عنوان فیکساتیو باعث اتصال متقاطع ملکول­های آنتی­ژن و در نتیجه پنهان شدن محل­های آنتی­ژنتیک می­شود. استفاده از آنزیم­های پروتئولیتیک باعث شکستن اتصالات متقاطع شده و لذا خواص آنتی ­ژنتیک آن­ها را پدیدار می­سازد. تریپسین و پپسین گاوی آنزیم­هایی هستند که به­طور شایع استفاده می­شوند. تفسیر طرح رنگ ­آمیزی   (Interpretation of staining patterns of staining) تفسیر نتایج رنگ­آمیزی به مهارت و تجربه نیازداشته و شخص نه تنها...
ادامه مطلب

بلوک­های پلاستیکی (Plastic embedding)

بلوک ­های پلاستیکی (Plastic embedding) تهیه ­ی بلوک­های پلاستیکی به­جای بلوک­های پارافینی، با توجه به طول کوتاه فیکساسیون به­کار می­رود باعث کاهش واکنش­های ایمونوهیستوشیمی و در این­گونه موارد استفاده از آنزیم­های پروتئولیتیک کمک­کننده است. توصیه می­شود برای دکلسیفیکاسیون به­جای اسید نیتریک از اسید تری­کلرواستیک استفاده می­شود. پردازش بافت (Tissue processing) حرارت بالای ۶۰ درجه­ی سانتیگراد می­تواند باعث دناتوراسیون آنتی­ژن­های شود و علاوه بر آن مرفولوژی سلولی به­خصوص...
ادامه مطلب

کروموژن­ها  (Chromogens)

کروموژن­ها  (Chromogens) کروموژن­های گوناگونی برای سیستم­های آنزیمی مختلف وجود دارد. DAB رایج­ترین کروموژنی است که امروزه استفاده می­شود. رنگ قهو­ای واکنش به سهولت قابل رویت بوده و مقاومت آن نسبت به الکل، آن را برای طیف وسیعی از رنگ­ آمیزی­ ها Counterstain و چسب­ ها مناسب می­سازد. روش­ های تشدید واکنش (Enhancement methods) یون­های فلزات یا ترکیبات آلی را می­توان به منظور تشدید رنگ محصولات کروموژن به ­کار برد. غوطه­ور کردن برش­های رنگ شده در محلول ۵/۰% سولفات مس، شدت رنگ را افزایش...
ادامه مطلب

روش آویدن – بیوتن   (Avidin – biotin technique)

روش آویدن – بیوتن   (Avidin – biotin technique) بیوتین یک ویتامین با وزن مولکولی پائین را می­توان با پیوندهای کووالانت به آنتی­بادی اولیه متصل کرد و یک کنژوگه بیوتین آنتی­بادی ایجاد کرد که وقتی به برش بافتی اضافه می­شود در محل آنتی­ژن مورد نظر متصل گردد. آویدین گلیکوپروتئین سفیده­ی تخم ­مرغ ۴ محل اتصال برای بیوتین دارد. بنابراین آویدین را می­توان به عنوان پلی برای رنگ­آمیزی ایمونو آنزیمی چند لایه کاربرد دارد. افزودن آویدینی که به صورت شیمیایی با horseradish Peroxidase کنژوگه شده...
ادامه مطلب

روش ­های آنزیم ضد آنزیم (Enzyme – antienzume techniques)

روش­ های آنزیم ضد آنزیم       (Enzyme – antienzume techniques) در این روش­ها آنتی ­بادی با آنزیم کنژوگه نمی­شود بلکه از آنتی­ بادی علیه آنزیم استفاده می­شود تا پلی­بین آنتی ­بادی اولیه و آنزیم بسازیم. به این طریق دیگر به کنژوگه کردن آنتی­­ بادی با آنزیم نیازی نیست، فرآیندی که علاوه بر اینکه از نقطه نظر تکنیکی مشکل است در عین حال تمایل اتصال آنتی­بادی به آنتی­ژن ر ا کاهش می­دهد. این تکنیک برای اولین بار توسط استرنبرگر و همکارانش در سال ۱۹۷۰ معرفی شد. وی از سیستم Peroxidase antiperoxidase...
ادامه مطلب

تکنیک­های ایمونوآنزیمی(Immuni enzyme thchniques)

تکنیک­های ایمونوآنزیمی(Immuni enzyme thchniques) اساس این تکنیک­ها بر پایه­ی اتصال یک آنزیم به یک آنتی­بادی اختصاصی استوار است. فعالیت آنزیم باعث ایجاد تغییر رنگ قابل رویت در محل کمپلکس آنتی­بادی و آنزیم و آنتی­ژن در بافت می­شود. سردسته­ی این آنزیم­ها Horeseradish peroxidase است. از سایر آنزیم­ها می­توان Alkaline phosphatase نام برد. رنگ­ آمیزی ایمونوآنزیمی مستقیم  (Direct immunoenzyme staining) در این روش از یک آنتی­بادی کنژوگه با آنزیم جهت ترکیب با آنتی­ژن بافتی مورد نظر استفاده می­شود. سپس برش با...
ادامه مطلب

مروری بر روش های ایمونوهیستوشیمی

مروری بر روش­های ایمونوهیستوشیمی مقدمه کاربرد ایمنوپراکسیداز و تکنیک­های هیبریدوما از مهم­ترین پیشرفت­های تکنیکی در پاتولوژی تشریحی به­ شمار می­روند. این تحولات زمانی رخ داد که روش­های درمانی پیچیده­ی سرطان در حال حاضر تشخیص دقیق­تر مرفولوژیک را قبل از انتخاب روش درمانی مناسب اجباری نماید. امروزه تشخیص­هایی نظیر تومور اندیفرانسیه دیگر جوابگو نیستند و پاتولوژیست باید با استفاده از تکنیک­های جدید، تشخیص­های خود را محدودتر و اختصاصی کرده و با روش­های درمانی...
ادامه مطلب

دراکونکولوس مدینن سیس   Dracunculus medinesis

دراکونکولوس مدینن سیس        Dracunculus medinesis بیولوژی: فیلاریا مدینن­سیس، فیلردومدین و کرم گینهنیز از نام­های دیگر این انگل است. ضمن اینکه در فارسی این کرم به نام­های کرم پیوک، رشته و کرم مدینه معروف است. کرم نر به طول ۴۰-۲۰ میلیمتر و ماده ۱۰۰ – ۵۰ سانتیمتر می­باشد. پس کرم ماده خیلی بزرگ­تر از نر است. کرم نر دارای یک دم مخروطی شکلف دو عدد اسپیکول نامساوی و یک گوبرناکولوم  است. سیر تکامل و بیماریزایی: پس از انجام حفت­گیری بین کرم نر و ماده در داخل بدن از بین رفته و ماده...
ادامه مطلب

انتروبیوس ورمیکولاریس   Enterobius  Vermicularis

انتروبیوس ورمیکولاریس     Enterobius  Vermicularis بیولوژی: اکسیور، کرم سنجاقی، کرم نخی شکل و یا کرمک (به فارسی) از نام­های دیگر انگل می­باشند. کرم بالغ به شکل استوانه­ای و نخی شکل، به رنگ سفید یا پوسته نرم می­باشد. دهان دارای سه لب کوچک به همراه حفره دهانی کوچک است. طول کرم نر ۵-۲ میلیمتر و کرم ماده ۱۳- ۸ میلیمتر می­باشد. کرم نر شبیه علامت سوال معکوس، دارای یک اسپیکول و فاقد گوبناکولوم می­باشد. تخم انگل به شکل بیضی نامتقارن و با جدار دو لایه می­باشد که پس از خروج از رحم داخل آن...
ادامه مطلب

آسکاریس  لومبریکوئیدس  Aacaris Lumbricoides

آسکاریس  لومبریکوئیدس-  Aacaris Lumbricoides بیولوژی: این کرم را کرم حلقوی بزرگ روده می­نامند. در کشور ما شایع­ترین آلودگی کرمی و پس از اکسیور شایع­ترین کرم انگلی انسان در دنیا و به­خصوص در مناطق گرمسیری می­باشد. طول کرم نر ۳۰- ۱۵ سانتیمتر و طل کرم ماده ۳۵ – ۲۰ سانتیمتر می­باشد. کرمی است سفید یا کرم رنگ، دهان دارای سه لب، فاقد حفره­ی دهانی و حلق، مری فاقد اتساع و کرم نر دارای دو اسپیکول مساوی و فاقد گوبرناکولوم می­باشد. دارای دو نوع تخم بارور و غیر بارور می­باشد. تخم غیر...
ادامه مطلب